对黑热病的诊断,除病原检查外,过去还应用了微量补体结合试验进行过辅助诊断,但该法操作复杂,敏感性和特异性不高,推广应用不够满意。自 1978年以来我们试用微量间接荧光抗体试验(IFAT)对黑热病进行诊断,取得了较好的效果,并取代了微量补体结合试验。本试验对疑似黑热病病人首先进行了IFAT、球蛋白沉淀试验及醛凝试验,最后进行了病原学检查,并对以上三种试验做了评价。现将结果报告如下:
1材料与方法
1.1抗原制备
按参考文献[1]的方法,收集“NNN”培养基培养的利什曼原虫前鞭毛体,经洗涤后加入适量抗凝兔血推片制成薄血膜,-30℃干燥保存。
1.2观察对象
1988年以来因肝脾肿大,发烧,贫血等症状来我所就诊者并经查阅病案做过IFAT、球蛋白沉淀试验、醛凝试验的41例病人,耳垂采血20μl滴于滤纸上,待干后以0.2ml 0.01mol/L PBS,pH7.2,37℃ 浸泡2h或4℃冰箱内过夜。
1.3IFAT
按常规方法进行。
1.4IFAT结果判断标准
“+++”鞭毛体呈现强黄绿色萤光,整个虫体结构及鞭毛清晰可见。“++”虫体的荧光亮度较“+++”弱,但结构较清晰。“+”虫体仍有黄绿色荧光,但亮度与虫体结构的清晰程度较差。“-”虫体暗淡不显荧光。每次试验均作阳性及阴性血清对照。阳性者在1∶20稀释的基础上,再做倍比稀释,以观察试验的最终阳性滴度。
2结果
1988年以来,因肝脾肿大,低烧等疑似黑热病患者来我所就诊者,其中有病案记载的病人41例,均进行过IFAT,球蛋白沉淀试验,醛凝试验,有的再根据以上结果进行淋巴结、髂骨穿刺涂片查找利什曼原虫,其中7例发现利什曼原